immunoelettroforesi

Il immunoelettroforesi è utilizzato per la rilevazione diagnostica di laboratorio di anticorpi monoclonali nel sangue di un paziente. Gli anticorpi monoclonali derivano dalla stessa cellula e sono diretti contro gli stessi antigeni. Per questo motivo, devono essere valutati come patologici e, se provati, parlano di malattie come il morbo di Waldenström.

Cos'è l'immunoelettroforesi?

Gli ioni hanno mobilità diversa. Questa diversa mobilità costituisce la base della procedura di elettroferesi. Questi metodi separano sostanze diverse l'una dall'altra utilizzando campi elettrici e gravità. Un metodo ben noto nel campo è l'immunoelettroferesi.

Questo è un metodo diagnostico qualitativo utilizzato per rilevare gli anticorpi monoclonali. Gli anticorpi sono sostanze proteiche immunologicamente attive provenienti da una specifica linea cellulare. Gli anticorpi monoclonali sono tutti basati sugli stessi linfociti B e sono quindi diretti contro un singolo epitopo. Ogni risposta immunitaria naturale agli antigeni invasori corrisponde a una risposta policlonale ed è quindi diretta contro epitopi diversi. Una risposta immunitaria monoclonale fornisce quindi indicazioni sui processi corporei patologici.

Gli anticorpi monoclonali legano diverse molecole con elevata specificità. Questo legame può essere dimostrato mediante immunoelettroforesi. La procedura è una procedura qualitativa nella diagnostica di laboratorio e consiste nei due tipi di procedura, elettroforesi sierica e immunodiffusione.

Funzione, effetto e obiettivi

L'immunoelettroforesi combina la metodologia dell'elettroforesi sierica con l'immunodiffusione. Il siero del paziente viene posto su un gel di agarosio o su una pellicola di acetato di cellulosa. Viene applicato anche un siero di controllo. L'applicazione è seguita da una separazione elettroforetica dei campioni. Antisieri, IgG, IgA, IgM, acido acetico per la normale elettroforesi e kappa e lambda vengono applicati tra le linee di divisione.

Questo crea una reazione con gli anticorpi nel siero del paziente, che crea linee di precipitazione. A seconda dell'antisiero utilizzato e della posizione e della forma delle singole linee, si possono trarre conclusioni sulle immunoglobuline contenute nelle catene leggere kappa o lambda. Nel caso di una banda lambda, ci sono catene leggere libere costituite da anticorpi. Il laboratorio fornisce ulteriori prove tramite le rare IgE e IgD, che consentono una determinazione esatta delle immunoglobuline. Un metodo di elettroforesi di immunodiffusione avviene secondo Pierre Grabar e Curtis Williams e corrisponde a una combinazione di elettroforesi su gel di agarosio di proteine ​​e diffusione di anticorpi.

Per prima cosa avviene l'elettroforesi su gel di agarosio. Successivamente, gli anticorpi contenuti si diffondono contro le bande di antigeni e creano così archi precipitati. Questo è da distinguere dall'immunoelettroforesi a razzo secondo Laurell, che corrisponde all'elettroforesi di proteine ​​all'interno di un gel di agarosio, ciascuna delle quali ha anticorpi in una certa concentrazione. C'è un tampone leggermente basico nel gel, che consente solo agli antigeni di migrare e che forza la maggior parte degli anticorpi al punto isoelettrico attraverso l'esposizione al valore di pH leggermente basico finché non smettono di muoversi elettroforeticamente.

All'inizio di un'immunoelettroforesi a razzo c'è un eccesso di antigene, in modo che si formino complessi solubili antigene-anticorpo. Durante l'elettroforesi, c'è anche un legame tra antigeni e altri anticorpi. In questo modo, nel punto di equivalenza si formano immunoprecipitati, che assomigliano a figure simili a razzi con un'altezza proporzionale alla concentrazione dell'antigene. L'altezza del precipitato viene misurata per valutare il test.

Puoi trovare i tuoi farmaci qui

Rischi, effetti collaterali e pericoli

La rilevazione degli anticorpi monoclonali è di particolare importanza per la diagnosi del mieloma multiplo e della malattia di Waldenström. Le prove fornite parlano di una degenerazione maligna delle cellule immunitarie. Il mieloma multiplo corrisponde a un cancro nel midollo osseo, che è caratterizzato dalla moltiplicazione maligna delle cellule produttrici di anticorpi nel plasma.

Queste plasmacellule producono anticorpi e i loro frammenti. Le plasmacellule maligne provengono sempre da una cellula precursore comune e sono quindi geneticamente identiche. Producono solo anticorpi monoclonali. La malignità di questa malattia può corrispondere a uno stadio precanceroso, ma può anche raggiungere uno stadio altamente maligno, che senza trattamento è rapidamente fatale. I sintomi della malattia derivano dalla crescita maligna delle cellule o dagli anticorpi e dai frammenti di anticorpi. I sintomi più comuni includono dolore osseo, dissoluzione ossea e fratture spontanee.

Il livello di calcio nel sangue è spesso aumentato. Inoltre, gli anticorpi anormali sono spesso depositati nel tessuto e causano disturbi funzionali negli organi, che possono portare a sintomi come insufficienza renale o alterazione del flusso sanguigno. La malattia di Waldström è anche una malattia tumorale maligna. Più precisamente, è una malattia di linfoma maligno che viene annoverata tra i linfomi non-Hodgkin a cellule B a progressione lenta e quasi asintomatici. Nella maggior parte dei casi, nella malattia può essere rilevata una produzione anormale di IgM monoclonali dovuta all'attività delle cellule di linfoma maligno.

La malattia di Waldenström è estremamente simile al mieloma multiplo nelle sue proprietà, ma di solito mostra un decorso più favorevole. La maggior parte dei pazienti con malattia di Waldenström è in gran parte asintomatica al momento della diagnosi. Altri pazienti mostrano sintomi precoci come stanchezza aspecifica o neuropatie periferiche, che derivano dalla deposizione di IgM monoclonali all'interno della guaina mielinica. Anche piccole quantità di IgM possono innescare la polineuropatia. Nessuna polineuropatia si verifica in altri pazienti, anche a livelli elevati. Inoltre, possono verificarsi sintomi aspecifici come febbre, perdita di peso indesiderata o sudorazione notturna. Anche il dolore osseo è caratteristico.

A causa della sovrapproduzione di IgM, il sangue diventa iperviscoso, cosicché i sintomi citati possono essere associati a quelli di una sindrome da iperviscosità. Nella maggior parte dei casi, questa tendenza al sanguinamento si manifesta in frequenti epistassi, mal di testa, malessere generale o visione offuscata e disturbi acustici. Al fine di rilevare malattie maligne di questo tipo, l'immunoelettroferesi è diventata da tempo una procedura diagnostica standard.